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肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。用純化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素1β(IL-1β),再與HRP 標(biāo)記的白介素1β (IL-1β)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素1β (IL-1β)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠白介素1β (IL-1β)濃度。
小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證,充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn),確保ELISA試驗(yàn)結(jié)果。而本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,能更有效的保持試劑穩(wěn)定,并且容易保存,其操作方法簡(jiǎn)單,結(jié)果判定比同類(lèi)產(chǎn)品更客觀更具優(yōu)勢(shì)。
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒關(guān)于樣本處理那些事:
(1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:小鼠白介素-1β酶聯(lián)免疫試劑盒應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
(3)尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。人組胺檢測(cè)試劑盒品牌通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(5)組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
(6)標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
(7)不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒。