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1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
9. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體
雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體
雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體
雙氧化酶成熟因子抗體
胞質(zhì)分裂專一蛋白7抗體
DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體
死亡相關(guān)蛋白3抗體
防御素α6抗體
S期激酶活化蛋白DBF4B抗體
脫氧胞苷激酶抗體
短鏈脫氫還原酶3抗體
DNA聚合酶θ/DNA pol θ抗體
DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體
磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體
磷酸化D激酶衰減蛋白1抗體
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
磷酸化D激酶衰減蛋白1抗體
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體