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產(chǎn)品名稱:載脂運載蛋白-1ELIS檢測試劑盒

產(chǎn)品特點:載脂運載蛋白-1ELIS檢測試劑盒相關(guān)名稱:豬粘膜血管地址素細胞黏附分子1(MADCAM1)免疫試劑盒phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)
豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免疫試劑盒phospho-ASK1 (Ser967)

產(chǎn)品型號:48T/96T

更新日期:2021-04-16

訪問次數(shù):399

48T/96T載脂運載蛋白-1ELIS檢測試劑盒的詳細資料:

產(chǎn)品名稱:載脂運載蛋白-1ELIS檢測試劑盒
英文名稱:Lipocalin-1
產(chǎn)品貨號:EY-E97533
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品保存:2-8℃,有效期6個月
主要組成成分:試劑 
    性狀:液體 
    產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T 
    96T指可以做94個標(biāo)本,2個標(biāo)準對照 
    48T指可以做47個標(biāo)本,1個標(biāo)準對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。 

樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

293T, SV40轉(zhuǎn)的人胚腎上細胞系

BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePANC-1, 人胰腺細胞

HuH-7(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

中分子量單一蛋白Marker(45 kD)50次國產(chǎn)

DU 145(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2

人支氣管上皮細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蘇云金芽胞桿菌幕蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus黑木耳 Auricularia auricula

載脂運載蛋白-1ELIS檢測試劑盒熒光素Cy3標(biāo)記Albumin /Cy3 0.1ml

熒光素Cy3標(biāo)記胰AACT/Cy3 0.1ml

Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(細胞流式同型對照)Goat IgG/Alexa Fluor 555 0.1ml

Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(細胞流式同型對照)Rat IgG/Alexa Fluor 555 0.1ml

熒光素PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(細胞流式同型對照)Rabbit IgG/PE-Cy7 0.1ml

(親和純化) 牛IgGBovine IgG  10mg

辣根過氧化物酶標(biāo)記Biotin/HRP 0.1ml

熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白BSA/FITC 0.3ml

羅丹明標(biāo)記牛血清白蛋白BSA/RBITC 0.3ml

羅丹明標(biāo)記狗IgMDog IgM/RBITC 0.3ml

熒光素Cy3標(biāo)記狗IgMDog IgM/Cy3 0.1ml

ELISA 試驗時,注意事項如下: 
     1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括: 
     (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     (2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。 
     (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。 
     (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。

 

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