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本公司代理ATCC細(xì)胞，提供小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱  小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細(xì)胞系。它可在體外常規(guī)傳代培養(yǎng)，產(chǎn)生高濃度的黑色素?？捎糜诜肿由飳W(xué)中黑色素基因的表達(dá)研究。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C24

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

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小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存在運(yùn)輸?shù)倪^程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請?jiān)囍门_盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無活力，請?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級N-Stearoyldihydro-D-erythro-SphingosineN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇

質(zhì)量規(guī)格：BR,UV>30%N-tert-Butyl-α-phenylnitroneN-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))

質(zhì)量規(guī)格：BRBOC-L-MethionineN-叔丁氧羰基-L-

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OHN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天

質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-TyrosineN-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-

質(zhì)量規(guī)格：38000~42000mpa.sN6-Cbz-L-LysineN-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRFmoc-Lys(Z)-OHN'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>99%，5NN'-Nitro-D-arginineN'-硝基-D-

pKD1pRC250g

pKH3pRC/CMV250g

pKJE7PrecipitatedTMBChromogenicKit250g

pKK223-3批次1PrehybridizationSolutionsinSSC250g

pKK232-8PrehybridizationSolutionsinSSPE250g

pKK233-3PremixedAcr-BisPowder250g

pKLAC1PremixedAcr-BisPowder250g

pLacZPremixedBCIP/NBTSolution250g

pLAMBLA1305.2PreScissiomProtease250g

pLAPSNPrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-C1PrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-N1pRetro-Off250g

pAdTrackpRetro-On250g

pLEGFP-N2pRetro-on-EGFP250g

pLentG-KOSMpRetro-on-RFP250g
小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16-F0保存Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4/Caspase 11  半胱胺酸蛋白酶4/11多克隆抗體     0.2ml

Caspase 5  半胱胺酸蛋白酶蛋白5多克隆抗體     0.1ml

Caspase 8  半蛋白酶8多克隆抗體     0.1ml

Caspase-1(actived P10)  天冬氨酸-特異性蛋白酶家族多克隆抗體     0.1ml

Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13多克隆抗體     0.2ml

caspase-3 p11  半胱天冬酶-3酶原多克隆抗體     0.1ml

caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3多克隆抗體     0.1ml