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產(chǎn)品名稱:兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存

產(chǎn)品特點(diǎn):了解更多兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存,相關(guān)資料如:說(shuō)明書(shū)、培養(yǎng)條件、注意事項(xiàng)及售后可咨詢我們?cè)诰€客服。收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基,不建議使用原瓶中運(yùn)輸用培養(yǎng)基。

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2019-02-25

訪問(wèn)次數(shù):565

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存的詳細(xì)資料:

本公司代理ATCC細(xì)胞,提供兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息,點(diǎn)擊了解更多其它源細(xì)胞

細(xì)胞名稱  兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存
形態(tài)特性 成纖維樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 北京眼科研究所建系細(xì)胞。

培養(yǎng)條件 F12:

Ham's F12 Nutrient Mixture 5%FBS  

傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天1次。

傳代情況 P5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS


細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
1.收到兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格:>98%cis-Zeatin順式玉米素

質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCSpan*20司班20

質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSpan*40司班40

質(zhì)量規(guī)格:BRSpan*60司班60

質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSpan*80司班80;司盤80

質(zhì)量規(guī)格:BRSecalciferol司骨化醇

質(zhì)量規(guī)格:IndGradeSparfloxacin

質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,SPSparfloxacin(標(biāo)準(zhǔn)品)

PGAM1/PGAM2磷酸變位酶1抗體規(guī)格:0.1ml

NETO1腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml

GTSE1/G2andSphaseexpressed1G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格:0.2ml

RBP4結(jié)合蛋白4抗體規(guī)格:0.1ml

GoatAnti-BovineIgG/AP堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的羊抗牛IgG規(guī)格:0.1ml

KCTD11鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體規(guī)格:0.2ml

CCDC127卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體規(guī)格:0.2ml

Phospho-p95/NBS1(Ser343)磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體規(guī)格:0.1ml

Hamartin/TSC1結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體規(guī)格:0.1ml

IGSF1抑制素結(jié)合蛋白抗體規(guī)格:0.2ml
兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存CD2抗體,兔多抗,抗原親和純化*

CD20/MS4A1抗體(APC),兔單抗*

CD20/MS4A1抗體(FITC),兔單抗*

CD20/MS4A1抗體(PerCP),兔單抗*

CD20/MS4A1抗體,鼠單抗*

CD20/MS4A1抗體,鼠單抗*

CD20/MS4A1抗體,兔多抗*

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF保存在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。

 

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