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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1)

產(chǎn)品中文名稱：線粒體膜電位分析試劑盒（JC-1法）

規(guī)格：20T/100T/500T

貨號(hào)：EY-01X8532
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

•  作為細(xì)胞健康的指標(biāo)，檢測(cè)線粒體膜電位。

•  使用JC-1，一種熒光，親脂，陽(yáng)離子染料。

•  紅色熒光表示健康的線粒體，綠色熒光表明健康狀況不佳的線粒體。

•  針對(duì)流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行了優(yōu)化。

•  含有CCCP（強(qiáng)效線粒體氧化磷酸化解偶聯(lián)劑）。

保存建議:請(qǐng)參閱說(shuō)明書中各個(gè)組分的存儲(chǔ)條件。自發(fā)貨之日起，在推薦溫度下至少穩(wěn)定12個(gè)月。

運(yùn)輸條件:藍(lán)冰運(yùn)輸

背景

線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。通過(guò) JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用 JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原

CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

EREG重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL18R1 Protein Rat 重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ING5重組人 ING5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

鴨白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuroblastoma aibody (NB-Ab) ELISA Kit 人抗神經(jīng)母細(xì)胞瘤抗體(NB-Ab)檢測(cè)試劑盒

HumanGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 人γ氨基(GABA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAChRab(Humanacetylcholinereceptoraibody)ELISAKit人乙酰受體抗體

鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試劑盒5/10次

Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

羊階段特異性表面抗原-1檢測(cè)試劑盒   羊階段特異性表面抗原-1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   羊階段特異性表面抗原-1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：羊階段特異性表面抗原-1試劑盒、羊階段特異性表面抗原-1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

鴨主要組織相容性復(fù)合體檢測(cè)試劑盒   鴨主要組織相容性復(fù)合體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   鴨主要組織相容性復(fù)合體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），動(dòng)?動(dòng)

大鼠胱抑素SN(CST1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： CST1 ELISA Kit

Rabbit apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 兔載脂蛋白A1(apo-A1)檢測(cè)試劑盒

甲型流感病毒H1亞型(IAV-H1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-8ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶

體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitThymosinα1犬α1

線粒體膜電位分析試劑盒（JC-1法）EREG重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4 0.5mg5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原

ING5重組人 ING5 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL18R1 Protein Rat 重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。