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本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human NRG1 Beta1 Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1-β1

規(guī)格：10 μg/50 μg/500 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8857
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

序列:氨基酸序列來(lái)源于：重組人調(diào)蛋白-1 β1 Q02297 (S20-K241) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長(zhǎng)度：重組人調(diào)蛋白-1 β1由220個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為24.04 KD。

純度:> 99% ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<1.0 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4。

基因ID:142445

使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干動(dòng)?動(dòng)

背景

Neuregulin 1 or NRG1 is one of four proteins in the neuregulin family that act on the EGFR family of receptors. This growth factor was originally identified as a 44 kD glycoprotein that interacts with the NEU / ERBB2 receptor tyrosine kinase to increase its phosphorylation on tyrosine residues. NRG1 is a trophic factor that has been implicated in neural development, neurotransmission, and synaptic plasticity. NRG1 has multiple isoforms that are generated by the usage of different promoters and alternative splicing of a single gene. Neuregulin 1 (NRG1) is essential for the development and function of multiple organ systems, and its dysregulation has been linked to diseases such as cancer and schizophrenia. NRG1 is a schizophrenia candidate gene and plays an important role in brain development and neural function. Schizophrenia is a complex disorder, with etiology likely due to epistasis.

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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Mouse somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測(cè)試劑盒

MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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通用型豬沙門氏菌(SwineSalmonella)試劑盒20次

ELISAKitvisfatin大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素

重組人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1-β1IL34重組小鼠 IL-34 蛋白 Protein

Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原 0.5mgCeruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原

ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form) Protein

CROT Protein Human 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白

產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷