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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

英文名稱：Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells

組織來(lái)源：臍帶組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人臍動(dòng)脈平滑肌分離自臍帶組織；它是臍動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤(pán)的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動(dòng)脈在胎盤(pán)的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤(pán)的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤(pán)，臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤(pán)運(yùn)送給胎兒。由于臍帶是分娩過(guò)程中的廢棄物，同時(shí)從臍帶中分離臍靜動(dòng)平滑肌細(xì)胞方法相對(duì)成熟，使得體外培養(yǎng)的臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人臍動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒

Human tuberculosis aibody IgG (TB-Ab IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)檢測(cè)試劑盒

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit 豬熱休克蛋白90(HSP-90)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha-EP(HumanAlpha-Endomorphin)ELISAKit人α-內(nèi)肽

血液精(arginine)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Phaseolusvulgarisagglinin,PHAELISAKit菜豆凝集素(PHA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原

BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein

INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白

TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白

Proinsulin 胰島素原 0.5mgProinsulin 胰島素原

INSL4 Protein Human 重組人 INSL4 / EPIL 蛋白

NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein

TNFRSF21 Protein Human 重組人 DR6 / TNFRSF21 蛋白

BAMBI重組人 BAMBI / NMA 蛋白 Protein

豚鼠白介素5(IL5)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL5 ELISA Kit

Human stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)檢測(cè)試劑盒

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaZP(Humanai-zonapellucidaaibody,aZP)ELISAKit人抗透明帶抗體

線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50次

RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit兔抗平滑肌抗體(ASMA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞人真核翻譯起始因子3a檢測(cè)試劑盒   人真核翻譯起始因子3a試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人真核翻譯起始因子3a試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人真核翻譯起始因子3a試劑盒、人真核翻譯起始因子3a 檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素檢測(cè)試劑盒   人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素試劑盒、人長(zhǎng)效甲狀腺刺激素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測(cè)試劑盒   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人粘膜相關(guān)上皮趨化因子試劑盒、人粘膜相關(guān)上皮趨化因子檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人早老素2檢測(cè)試劑盒   人早老素2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人早老素2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人早老素2試劑盒、人早老素2 檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用