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產(chǎn)品名稱：人椎間盤纖維環(huán)細胞

英文名稱：Human Intervertebral Disc Fibroblast Cells

組織來源：椎間盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚，而后側(cè)較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶，后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內(nèi)層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下，用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn)，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細胞質(zhì)內(nèi)線粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復(fù)合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會減弱，椎間盤開始退變。

公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

豚鼠鉤端IgG(Leptospira)檢測試劑盒 ，英文名： Leptospira ELISA Kit

Human toxic shock syndrome toxin 1 iegrated (TSST-1) ELISA Kit 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)檢測試劑盒

RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 兔子巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGFELISAKit大鼠堿性成纖維生長因子

細菌色肉湯500毫升

RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit兔子白介素1(IL-1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

FAS重組食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 Protein

IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mgIGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)

MUSK重組人 MUSK Kinase 蛋白 (aa 433-783, His & GST 標簽) Protein

IVD Protein Human 重組人 Isovaleryl-CoA dehydrogenase / IVD 蛋白 (aa 30-423, His 標簽)

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標簽)

IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mgIGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)

IVD Protein Human 重組人 Isovaleryl-CoA dehydrogenase / IVD 蛋白 (aa 30-423, His 標簽)

FAS重組食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 Protein

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標簽)

MUSK重組人 MUSK Kinase 蛋白 (aa 433-783, His & GST 標簽) Protein

豚鼠白介素13(IL-13)檢測試劑盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)檢測試劑盒

rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M

細菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人椎間盤纖維環(huán)細胞人載脂蛋白B1(apo-B1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A4（apo-A4）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A2(apo-A2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人載脂蛋白A1(apo-A1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝