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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔脂肪干細(xì)胞

英文名稱：Rabbit Adipose Stem Cells

組織來源：脂肪組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔脂肪干分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細(xì)胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞，主要恢復(fù)組織細(xì)胞的修復(fù)功能，促進(jìn)細(xì)胞的再生，恢復(fù)年輕面容的同時(shí)，身體機(jī)能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細(xì)胞具有很多優(yōu)點(diǎn)：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對(duì)供區(qū)的創(chuàng)傷較??；④獲得率及體外擴(kuò)增速率高。脂肪干細(xì)胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細(xì)胞。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪干采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶（MLCP）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬氧化酶（XOD）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬藍(lán)耳病抗體(PRRS-Ab)試劑盒

Human basic fibroblast growth factor 6 (bFGF-6) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)試劑盒

Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAMA(MouseAi-myocardialaibody)ELISAKit小鼠抗心肌抗體

血液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次

Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin 蛋白 (HA Subunit) (His 標(biāo)簽) Protein

PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂酶A2抗原

CRTAM重組人 CRTAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽)

AGRP Protein Human 重組人 AgRP 蛋白

PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2 0.2mgPAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(platelet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋脂酶A2抗原

APP Protein Human 重組人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H3N8 (A/equine/Gansu/7/2008) Hemagglutinin 蛋白 (HA Subunit) (His 標(biāo)簽) Protein

AGRP Protein Human 重組人 AgRP 蛋白

CRTAM重組人 CRTAM 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

兔脂肪干細(xì)胞大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(CTnⅠ)試劑盒 ，英文名： CTnⅠ ELISA Kit

Rabbit substance P (SP) ELISA Kit 兔p物質(zhì)(SP)試劑盒

牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit小鼠絲/蘇蛋酸酶

體液甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKit5-LO/LOX人5脂加氧酶

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

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